수영 세포 속도 반응
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수영 세포 속도 반응
이전 섹션에서 우리는 속도 반응의 느린 구성 요소가 고정자 역학과 F-ATPase에서 비롯된다는 점을 논의했습니다. 이 둘은 모두 ATP를 소모하여 PMF를 생성하고 역방향으로 작동할 수 있습니다( 38 , 44 ). 여기서는 고정자 역학과 F-ATPase 활성의 특징적인 시간 척도보다 빠른 광 변조를 사용하여 단시간 반응에 초점을 맞춥니다. PMF 반응에서 느린 역학 구성 요소를 더욱 제거하기 위해, 우리는 주로 F-ATPase가 제거된 균주를 사용합니다. 빠른 광 변조 조건에서, 활성화된 고정자의 수는 실질적으로 일정하게 유지되며, 모터 속도는 PMF에 비례할 것으로 예상됩니다( 14 , 16 , 17 ). 이 영역에서 프로테오로돕신은 PMF를 설정하는 제어 가능한 입력 역할을 하는 반면, 세포의 유영 속도는 직접적이고 접근 가능한 출력을 제공합니다. 먼저 그림 1d 에서 와 같이 높은 광도로 샘플을 몇 분 동안 비춰 셀이 결합된 고정자 유닛 수가 포화된 상태에서 시작하도록 합니다. 데이터 수집 동안 녹색 LED가 샘플을 3초 동안 비추고 3초 동안 꺼집니다. 이 켜짐-꺼짐 시퀀스를 5회 반복합니다. 그런 다음 펄스 폭 변조로 제어되는 다양한 LED 출력 범위에서 측정을 반복합니다. 전체 광도 스캔 동안 고정자 수의 큰 변화를 방지하기 위해 새로운 광도로 전환하기 전에 샘플을 최대 강도(펄스 폭 변조에서 100% 듀티 사이클)로 30초 동안 비춰 초기 상태를 재설정합니다. 과도 현상 동안 속도 응답은 모터 속도, 즉 PMF에 비례하지 않을 수 있는데, 이는 번들 형성의 역학도 영향을 미칠 수 있기 때문입니다. 그
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